液相色谱仪操作及原理(高效液相色谱仪的泵压力上不去是什么原因)

可能的原因：

1.purge阀没有拧紧；

2.泵体充满气体，可以拧紧出口阀开大流速直至有液体就出再拧紧即可；

3.某个管路接口没有拧紧或者某条管路断了导致漏液。

开电源，开机，设置参数方法，准备工作完成，开始平衡，分析，输出结果，打印。

液相色谱仪是指利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。 基本用途: 液相色谱仪对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。 使用范围: 应用于生物医学、环境化学、石油化工等部门。 系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内。 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。

高效液相色谱仪的图谱算不上指纹图谱，只是组份分离后的光谱吸收图，色谱分析方法主要是归一法，内标法，外标外等广州大学来定性定量的，比如在相同条件（流动相，色谱柱条件不变）下，分析已知含量的标准样品，得到相应的保留时间和面积，然后将相应的未知含量组份进样分析，得到图谱后，对比保留时间和面积，通过比较保留时间识别组份名称（定性），按比例计算出组份含量（定量）；

1．将已经过滤并脱气的流动相注入储液罐；

2. 用流动相冲洗金属过滤器，然后将过滤器浸入储液罐的流动相中；

3. 将储液罐放置在一定的高度，以避免由于搬运和其他操作人员的移动而造成不必要的跌落。

4. 然后按以下顺序依次启动高效液相色谱仪：泵→检测器→高效液相色谱软件→按预先计划的方法设置软件参数，如分析时间、检测波长、流速等。

5. 启动泵，运行5分钟，主要是为了排除系统中的气泡，结束后关闭所有排气阀；

6. 然后按照预先计划的速度，以固定的速率，如1mL/min左右，运行流动相，走基线，直到基线平稳，就可以在计算机软件上进行监视；

7. 基线平稳后，在软件中设置样品的运行参数，如流速和分析时间等。分析时间会因样品、流速、柱长等因素变化。

8. 参数设置完毕后，将固定体积的样品溶液注入进样阀，然后在软件中启动注入命令，进样器中的样品溶液就随流动相进入色谱柱；

9. 通过软件监视各项读数，当检测器检测到样品所有峰值，停止运行并设置新的进样。在下一个样品分析前，建议留出5-10分钟，待流动相通过色谱柱，以便清洗之前样品的残留物；确认基线稳定后，进行下一次注射。

10. 分析结束后，先关闭检测器，然后关闭泵，最后关闭软件。